5．各种pH值的Tris缓冲液的配制
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各种pH值的Tris缓冲液的配制 | |
| 所需pH值（25℃) |
0.1mol/L HCl的体积 |
|
7．1 |
45．7 |
|
7．2 |
44．7 |
|
7．3 |
43．4 |
|
7．4 |
42．0 |
|
7．5 |
40．3 |
|
7．6 |
38．5 |
|
7．7 |
36．6 |
|
7．8 |
34．5 |
|
7．9 |
32．0 |
|
8．0 |
29．2 |
|
8.1 |
26.2 |
| 8.2 | 22.9 |
| 8.3 | 19.9 |
| 8.4 | 17.2 |
| 8.5 | 14.7 |
| 8.6 | 12.4 |
| 8.7 | 10.3 |
| 8.8 | 8.5 |
|
8.9 |
7.0 |
某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：ml)的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml
（2)温度对50mmol/L Tris·HCl液pH值的影响
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4℃ |
25℃ |
37℃ |
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8．1 |
7．5 |
7．2 |
|
8．2 |
7．6 |
7．3 |
|
8．3 |
7．7 |
7．4 |
|
8．4 |
7．8 |
7．5 |
|
8．5 |
7．9 |
7．6 |
|
8．6 |
8．0 |
7．7 |
|
8．7 |
8．1 |
7．8 |
|
8．8 |
8．2 |
7．9 |
|
8．9 |
8．3 |
8．0 |
|
9．0 |
8．4 |
8．1 |
|
9．1 |
8．5 |
8．2 |
|
9．2 |
8．6 |
8．3 |
|
9．3 |
8．7 |
8．4 |
|
9．4 |
8．8 |
8．5 |
（6)常用缓冲液的pKa值
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缓冲液 |
分子量 |
pKa值 |
缓冲范围 |
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Trisa |
12.1 |
8.08 |
7.1～7.9 |
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HEPESb |
283.3 |
7.47 |
7.2～8.2 |
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MPOSc |
209.3 |
7.15 |
6.6～7.8 |
|
PIPESd |
304.3 |
6.76 |
6.2～7.3 |
|
MESe |
195.2 |
6.09 |
5.4～6.8 |
a：三羟甲基氨基甲烷；b：N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磷酸；c：3-（N-吗啉代)丙磺酸；d：N，N’-双（2-乙磺酸)哌嗪；e：2-（N-吗啉代)乙磺酸。
7．温度对常用缓冲液pH的影响
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缓冲体系 |
pKa(20℃) |
△pKa/10℃ |
|
Mes |
6.15 |
-0.110 |
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Ada |
6.60 |
-0.110 |
|
PiPes |
6.80 |
-0.085 |
|
Aces |
6.90 |
-0.200 |
|
Bes |
7.15 |
-0.160 |
|
Mops |
7.20 |
-0.013 |
|
Tes |
7.50 |
-0.200 |
|
Hepes |
7.55 |
-0.014 |
|
Tricine |
8.15 |
-0.210 |
|
Tris |
8.30 |
-0.310 |
|
Bicine |
8.35 |
-0.180 |
|
Glycylglycine |
8.40 |
-0.280 |
