| 公开(公告)号 | CN1308318C |
| 公开(公告)日 | 2007.04.04 |
| 申请(专利)号 | CN200410060963.7 |
| 申请日期 | 2004.10.15 |
| 专利名称 | 利用离体植株组织生产紫杉醇的方法 |
| 主分类号 | C07D305/14(2006.01)I |
| 分类号 | C07D305/14(2006.01)I;A01H4/00(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 华中科技大学 |
| 发明(设计)人 | 余龙江;刘 智;赵春芳;付春华;杨 英;杨 秦;李丽琴 |
| 地址 | 430074湖北省武汉市洪山区珞喻路1037号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 华中科技大学专利中心 |
| 代理人 | 方 放 |
| 国省代码 | 湖北;42 |
| 主权项 | 利用离体植株组织生产紫杉醇的方法，依序包括下述步骤：(1)选择春秋季节，采摘当年生红豆杉新鲜枝叶；(2)预处理：清洗去除新鲜枝叶中杂质，晾干，裁剪其长度至20-40cm；(3)将裁剪后的红豆杉枝叶扦插于无菌固体改良MS培养基上、或者将剪碎后的红豆杉枝叶培养于无菌液体改良MS培养基中，培养基中添加药剂抑制杂菌污染，培养环境条件黑暗、荫凉、干净；(4)上述步骤(3)培养过程的同时诱导处理：分别采用真菌诱导子，稀土元素或化学诱导剂对外植体诱导，扦插培养3-6天，剪碎培养1-3天；(5)上述步骤(3)培养过程的同时在培养基中添加紫杉醇生物合成的前体物质；(6)对经过前述培养、诱导、前体添加的红豆杉枝叶采用常规方法低温粉碎、有机溶剂浸提，得到紫杉醇浸提物； 所述步骤(4)中，真菌诱导子为红豆杉树皮中分离得到内生的黑曲霉、青霉菌、链霉菌、酵母或赤霉菌的细胞壁多糖提取物其中的一种，浓度为50mg/L；稀土元素为硝酸镧、硫酸铈铵、硝酸亚铈其中的一种，浓度为2mg/L；化学诱导剂为下述的一种或两种：茉莉酸甲酯、浓度为100μmol/L，茉莉酸、浓度为100μmol/L，水杨酸、浓度为80mg/L，矮壮素、浓度为10mg/L，乙烯利、浓度为1-5mg/L； 所述步骤(5)中，添加的前体物质分别为下述的一种：苯丙氨酸、浓度为2mmol/L，苯甲酸钠、浓度为0.5mmol/L，醋酸钠、浓度为2mmol/L，甘氨酸、浓度为0.1mmol/L。 |
| 摘要 | 利用离体植株组织生产紫杉醇的方法，属于生产药物的生物方法，具体涉及利用红豆杉科植株枝叶生产紫杉醇的方法，解决目前红豆杉枝叶采摘后直接提取的缺点，目的是提高采摘红豆杉枝叶中紫杉醇含量。本发明依序包括下述步骤：(1)选择季节采摘当年生红豆杉新鲜枝叶；(2)清洗、晾干并合理裁剪；(3)在黑暗、荫凉和外加营养条件下通过扦插或枝叶剪碎后组织培养；(4)培养的同时对外植体诱导处理；(5)培养过程的同时在培养基中添加紫杉醇生物合成的前体物质；(6)采用常规方法低温粉碎、有机溶剂浸提，得到紫杉醇浸提物。本发明大大提高紫杉醇的产量，降低前体物的含量，产品易于回收，无污染物排放。 |
| 国际公布 |
