| 公开(公告)号 | CN1920017A |
| 公开(公告)日 | 2007.02.28 |
| 申请(专利)号 | CN200610122176.X |
| 申请日期 | 2006.09.18 |
| 专利名称 | 一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法 |
| 主分类号 | C12N9/74(2006.01)I |
| 分类号 | C12N9/74(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 广东新科迪医药开发有限公司 |
| 发明(设计)人 | 徐 丹 |
| 地址 | 510220广东省广州市海珠区前进路上坑直街8号基立大厦首层 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 广州市南锋专利事务所有限公司 |
| 代理人 | 刘 媖 |
| 国省代码 | 广东;44 |
| 主权项 | 一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法，其特征是包括下述步骤：(1)尖吻蝮蛇粗毒加磷酸缓冲液溶解制成粗毒溶液；(2)层析柱用NaOH溶液去除热原，用磷酸缓冲液平衡；(3)粗毒溶液上样，用0→0.1M NaCl磷酸缓冲液梯度冼脱，进行一次纯化，收集用促人血浆凝固活性，HPLC和SDS-PAGE鉴定的尖吻蝮蛇凝血酶目标组份；(4)对一次纯化的目标组份进行透析；(5)透析后的目标组份进行再次层析，用0→0.1MNaCl磷酸缓冲液梯度洗脱，收集用促人血浆凝固活性、HPLC和SDS-PAGE鉴定的高纯度尖吻蝮蛇凝血酶目标组份；(6)按步骤(5)的方法对收集的再次纯化目标组份进行第三次纯化；(7)对第三次纯化后的尖吻蝮蛇凝血酶用Sephadex G-25层析柱脱盐；(8)对纯化后的尖吻蝮蛇凝血酶经促人血浆凝固活性，HPLC，SDS-PAGE电泳鉴定。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法，属于蛇毒蛋白技术领域，分离纯化的方法是：磷酸缓冲液溶解蛇毒→层析柱去除热原后平衡→一次纯化→透析→再次纯化→三次纯化→脱盐→鉴定。本发明的方法利用磷酸缓冲液对尖吻蝮蛇粗毒进行分离纯化，分离纯化的尖吻蝮蛇凝血酶纯度高(大于95％)，收率较高(可达6～8％)，可以为尖吻蝮蛇毒的有效利用提供一种新途径。 |
| 国际公布 |
