| 公开(公告)号 | CN1824775A |
| 公开(公告)日 | 2006.08.30 |
| 申请(专利)号 | CN200510016592.7 |
| 申请日期 | 2005.02.25 |
| 专利名称 | 重组人血管抑素K1-3的制备工艺及其制品在肿瘤治疗药物中的应用 |
| 主分类号 | C12N15/12(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/12(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61K38/39(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 东北师范大学遗传与细胞研究所 |
| 发明(设计)人 | 李玉新;乌 垠;鲍永利;王秀红;孟祥颖;易静雯;黄百渠;郝 水 |
| 地址 | 130021吉林省长春市人民大街5268号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 陈宏伟 |
| 国省代码 | 吉林;22 |
| 主权项 | 一种制备重组人血管抑素K1-3的制备工艺，该工艺是由基因克隆、工程菌的诱导培养、重组产物的纯化和复性过程组成，其步骤如下： (1)通过PCR方法从人肝细胞中克隆了人纤溶酶原cDNA中Kringle1-3的cDNA片段，在克隆时对其N-端和C-端序列进行了优选。 (2)将这一cDNA片段克隆入自行设计构建的原核表达载体pHB中，用重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)，经筛选得到高效表达重组人血管抑素的基因工程重组子。 (3)经发酵培养和诱导表达重组人血管抑素的菌体经超声裂解、离心洗涤包含体后将其溶解，之后经过阴离子交换层析、调酸稀释复性、阳离子交换层析、超滤浓缩及凝胶过滤等手段纯化而得到人重组血管抑素蛋白质纯品。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种人血管抑素K1-3的制备方法及其制品在抗肿瘤治疗中的应用。本发明在对天然人血管抑素的生成机制、分子特性和生物学活性进行深入系统研究的基础上，对重组人血管抑素的蛋白氨基酸序列进行了优选，并自行设计构建了重组人血管抑素的原核高效表达系统，使血管抑素K1-3的表达量达到工程菌可溶性蛋白的50％以上，同时建立了最适的纯化及复性工艺，使重组人血管抑素的纯度达99.9％以上并能正确折叠。由此获得的重组人血管抑素K1-3能抑制肿瘤新生血管的生成，并对多种肿瘤具有治疗作用。 |
| 国际公布 |
