| 公开(公告)号 | CN1310677C |
| 公开(公告)日 | 2007.04.18 |
| 申请(专利)号 | CN200410039540.7 |
| 申请日期 | 2004.02.05 |
| 专利名称 | 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法 |
| 主分类号 | A61K39/205(2006.01)I |
| 分类号 | A61K39/205(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 发明(设计)人 | 柳纪省;殷相平;白银梅;胡永浩;李志勇;张兴旺;王 辉;兰 喜;李宝玉;刘兆弼 |
| 地址 | 730046甘肃省兰州市盐场堡徐家坪11号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京金信立方知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 王鸿谋 |
| 国省代码 | 甘肃;62 |
| 主权项 | 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法，其特征是它包括如下过程：一、制备目的基因：设计引物，通过PCR的方法扩增出狂犬病病毒抗原蛋白G基因与N基因；二、构建重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体：将所述的抗原蛋白G基因与N基因插入到复制缺陷型腺病毒穿梭载体特异性启动子和终止子之间，构建成含有融合基因G+N的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV/G+N；三、获得复制缺陷型腺病毒质粒：将获得的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1通过在大肠杆菌中质粒间同源重组从而得到重组腺病毒质粒；四、用重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒，包括以下操作：1)酶切，用Pac I酶切腺病毒质粒，2)转染，转染293细胞，3)接种293细胞，4)冻存，将基因组结构均一的重组腺病毒冻存；将所述的重组腺病毒制成狂犬病活载体疫苗，直接注射动物进行免疫。 |
| 摘要 | 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法，包括如下过程：一、制备目的基因：设计引物，扩增出狂犬病病毒(rabies virus，RV)抗原蛋白G基因与N基因；二、构建腺病毒穿梭载体：将抗原蛋白G基因与N基因插入到复制缺陷型腺病毒穿梭载体特异性启动子和终止子之间，构建成含有融合基因(G+N)的腺病毒穿梭载体(pAdTrack-CMV/G+N)；三、获得腺病毒质粒：将获得的重组复制缺陷型腺病毒穿梭载体(pAdTrack-CMV/G+N)与腺病毒骨架载体(pAdEasy-1)通过同源重组得到重组腺病毒质粒；四、用重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒，将重组腺病毒制成狂犬病活载体疫苗。本发明较之现有狂犬病疫苗更为安全和有效，制作周期较短。 |
| 国际公布 |
