| 公开(公告)号 | CN1261581C |
| 公开(公告)日 | 2006.06.28 |
| 申请(专利)号 | CN99806686.9 |
| 申请日期 | 1999.04.14 |
| 专利名称 | 在原核细胞有控制地表达重组蛋白质的新构建体 |
| 主分类号 | C12N15/71(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/71(2006.01)I;C12N9/88(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 1998.4.14 FR 98/04638 |
| 申请(专利权)人 | 皮埃尔法博赫药品公司 |
| 发明(设计)人 | L·切瓦莱特;A·罗伯特;J-Y·博纳福伊;T·N·盖因 |
| 地址 | 法国布洛涅-比扬古 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | 1999-04-14 PCT/FR1999/000874 |
| 进入国家日期 | 2000.11.27 |
| 专利代理机构 | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 |
| 代理人 | 陈文平 |
| 国省代码 | 法国;FR |
| 主权项 | 生产其基因处于Ptrp色氨酸操纵子启动子控制下的目标重组蛋白的方法，其特征在于它包括如下步骤：a)用载体转化能够合成能被色氨酸诱导的色氨酸酶的原核宿主细胞，所述载体包含当被导入所述宿主细胞时能灭活TnaA色氨酸酶编码基因的核酸序列，并将所述序列整合至所述宿主细胞的DNA中；并且预先、随后或同时将Ptna色氨酸酶操纵子启动子或其生物学活性片段的序列导入所述原核细胞，其中所述Ptna色氨酸酶操纵子或其生物学活性片段在3’位置后连接着编码本质上是核糖核苷酸或蛋白质并对Ptrp启动子或其转录产物起抑制作用的分子的核酸序列，所述生物学活性片段能够指导或控制位于所述片段下游的基因的表达；b)用含有置于Ptrp色氨酸操纵子启动子控制下的所述目标重组蛋白编码基因的载体转化所述原核细胞；c)在允许重组蛋白表达的培养基中培养所述转化细胞；和d)从培养基或从所述转化细胞回收重组蛋白，所述方法还在步骤a)和b)之间包括分离和筛选步骤。 |
| 摘要 | 本发明涉及用于在原核宿主细胞中表达处于Ptrp色氨酸操纵子启动子控制之下的重组目标蛋白编码基因的新构建体。本发明的特征在于该构建体包含当导入所述宿主细胞中时能灭活TnaA色氨酸酶编码基因的核酸序列。本发明还涉及含有所述构建体的载体和转化了所述载体的宿主细胞。本发明还涉及用所述新构建体产生所述重组蛋白的方法。 |
| 国际公布 | 1999-10-21 WO1999/053080 法 |
