| 公开(公告)号 | CN1733929A |
| 公开(公告)日 | 2006.02.15 |
| 申请(专利)号 | CN200510028285.0 |
| 申请日期 | 2005.07.29 |
| 专利名称 | 一种重组人复合α干扰素的制备方法 |
| 主分类号 | C12P21/02(2006.01)I |
| 分类号 | C12P21/02(2006.01)I;C12N15/20(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 华东理工大学 |
| 发明(设计)人 | 储 炬;郝玉有;张嗣良;庄英萍;史琪琪;王永红;杭海峰;刘志敏;杨士珍;吴康华 |
| 地址 | 200237上海市徐汇区梅陇路130号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海顺华专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 陈淑章 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种重组人复合α干扰素(cIFN)制备方法，其主要步骤是：将酵母工程菌(PichiapastorisGS115/pPIC9K-cIFN)经种子培养、发酵罐培养、外源蛋白诱导表达及目标蛋白纯化后获得cIFN，其特征在于，在外源蛋白诱导表达启动时加入Tween-20、Tween-80、SDS、TritonX-100、TritonX-114、NP-40、CHAPS、Zwittergent3-14、LiDS、胆酸钠、脱氧胆酸钠、辛匍糖苷(Octylglucoside)或/和Brij35，加入量为0.01～10g/L发酵液；外源蛋白诱导表达的温度控制在20～30℃；外源蛋白诱导表达时发酵液的pH值控制在3.0～7.0且发酵液中的甲醇含量控制在10g/L发酵液以下。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种经真核表达制备重组人复合α干扰素(cIFN)制备方法，其主要步骤是：将酵母工程菌(Pichia pastoris GS115/pPIC9K-CIFN)经种子培养、发酵罐培养、外源蛋白诱导表达及目标蛋白纯化后获得cIFN，其特征在于，在外源蛋白诱导表达启动时加入Tween-20、Tween-80、SDS、Triton X-100、Triton X-114、NP-40、CHAPS、Zwittergent3-14、LiDS、胆酸钠、脱氧胆酸钠、辛匍糖苷或/和Brij35，加入量为0.01～10g/L发酵液；外源蛋白诱导表达的温度控制在20～30℃；外源蛋白诱导表达时发酵液的pH值控制在3.0～7.0且发酵液中的甲醇含量控制在1.0～10.0g/L发酵液。本发明不仅实现了cIFN的高密度高发酵表达，而且使cIFN在发酵液中维持了正确的单体分子状态和生物活性，大大抑制了cIFN聚合体和降解产物的形成。 |
| 国际公布 |
