| 公开(公告)号 | CN1657616A |
| 公开(公告)日 | 2005.08.24 |
| 申请(专利)号 | CN200510038289.7 |
| 申请日期 | 2005.01.25 |
| 专利名称 | 高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)的制取方法及用途 |
| 主分类号 | C12N15/09 |
| 分类号 | C12N15/09;C12N15/63;C12N15/23;A61K38/21 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 扬州大学 |
| 发明(设计)人 | 秦爱建;许金俊;孔桂美;刘岳龙;金文杰 |
| 地址 | 225009江苏省扬州市大学南路88号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 扬州市锦江专利事务所 |
| 代理人 | 江平 |
| 国省代码 | 江苏;32 |
| 主权项 | 一种高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)的制取方法，其特征在于由以下步骤制得：a、将ChIFN-γ基因从真核质粒pcDNA-ChIFN-γ中用EcoRI和NotI双酶切后克隆到转移载体pFASTBAC1中，获得重组转移质粒pFASTBAC1-ChIFN-γ；b、取DH10Bac感受态细胞，加入lngpFASTBAC1-ChIFN-γ，转座后，用SOC培养基10倍梯度稀释培养物，各取100μl涂布Luria平板，37℃培养24～48小时，挑取白色菌落，Luria平板进行四次筛选纯化，阳性质粒命名为Bacmid-ChIFN-γ，提取阳性质粒DNA用于下一步转染；c、取上述重组DNA质粒(Bacmid-ChIFN-γ)转染Sf9细胞。 |
| 摘要 | 高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素的制取方法及用途，涉及一种广谱高效抗病毒基因工程产品的制取方法。将ChIFN-γ基因从真核质粒中经双酶切后克隆到转移载体中，获得重组转移质粒pFASTBAC1-ChIFN-γ；取DH10Bac感受态细胞，加入1ng pFASTBAC1-ChIFN-γ，转座后，用SOC培养基稀释培养物，涂布Luria平板，培养后，挑取白色菌落，Luria平板进行纯化，阳性质粒命名为Bacmid-ChIFN-γ，提取阳性质粒DNA；取上述重组DNA质粒转染Sf9细胞，制得高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素。本发明还在于将该干扰素用于抑制MDV GA对CEF的致病变作用、抑制NDV F48E8在细胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒对细胞的致病作用。 |
| 国际公布 |
