具有绿色荧光蛋白示踪和抗性筛选标记的RNAi载体pGO
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公开(公告)号
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CN1539979A
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公开(公告)日
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2004.10.27
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申请(专利)号
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CN200310108141.7
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申请日期
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2003.10.24
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专利名称
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具有绿色荧光蛋白示踪和抗性筛选标记的RNAi载体pGO
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主分类号
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C12N15/63
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分类号
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C12N15/63;C12N15/79;A61K48/00;A61P35/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军第二军医大学
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发明(设计)人
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王红阳;鄢和新;张瑞;陈磊;吴孟超
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地址
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200433上海市杨浦区翔殷路800号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海新天专利代理有限公司
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代理人
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丁振英
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种RNAi载体pGO，包括pUC复制起点pUCori、fl复制起点flori、细菌启动子P、卡那霉素基因Kan、HSV-TKPolyA、U6启动子U6promoter和多克隆位点MCS，其特征在于还含有用于表达绿色荧光蛋白基因的转录元件，包括CMV启动子CMVpromoter、增强绿色荧光蛋白基因EGFP和SV40PolyA，以及用于表达真核细胞抗性筛选标志的新霉素基因转录元件，包括SV40早期启动子SV40epromoter和新霉素抗性基因Neo。
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摘要
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本发明涉及医药分子生物学技术领域，是一种可用于特异性抑制靶基因表达的具有绿色荧光蛋白示踪和真核细胞抗性筛选标记的RNA干扰(RNAi)载体pGO。本发明RNAi载体pGO是对pEGFP-C2载体的改造，去除了其原有的多克隆位点，在SV40 polyA和fl原核复制起点之间插入带有相应多克隆位点的U6启动子构成。只要在U6启动子下游的多克隆位点中的适当位点插入针对靶基因的siRNA模板，转染细胞后就可特异并有效地抑制该基因的表达。因而本发明的RNAi载体pGO可用于制备研究基因功能的试剂或用于抗肿瘤药物的研究和开发。
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国际公布
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