| 公开(公告)号 | CN1155713C |
| 公开(公告)日 | 2004.06.30 |
| 申请(专利)号 | CN96194540.0 |
| 申请日期 | 1996.04.05 |
| 专利名称 | 选择转基因植物细胞的方法 |
| 主分类号 | C12N15/82 |
| 分类号 | C12N15/82;C12N15/64 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 1995.4.6 US 08/417,618 |
| 申请(专利权)人 | 塞迷尼思蔬菜种子公司 |
| 发明(设计)人 | 安娜·朱莉娅·特鲁尔森 |
| 地址 | 美国加利福尼亚州 |
| 颁证日 | 2004.06.30 |
| 国际申请 | PCT/US1996/004688 1996.4.5 |
| 进入国家日期 | 1997.12.05 |
| 专利代理机构 | 中原信达知识产权代理有限责任公司 |
| 代理人 | 丁业平 |
| 国省代码 | 美国;US |
| 主权项 | 用于选择性增加在异养培养条件下培养的转化的和非转化的植物细胞混合物中再生的转化植物数量的方法，所说方法包括下列步骤：(a)在一种培养基中在异养培养条件下培养转化的和非转化的植物细胞的混合物，除了碳源外，所述培养基含有非转化植物细胞增殖和生长需要的基本营养和58.1mg/L至174.3mg/L的磷，所述碳源被一种加密碳源替代，该加密碳源不支持所说的非转化细胞的生长和增殖，所说的转化细胞含有最少含有一个表达盒的异源基因组DNA片段，所说的表达盒含有异源DNA可选择标记片段，该片段包括(i)编码异源酶的异源基因，所述异源酶的表达将加密碳源转化为在异养培养条件下支持所说转化植物细胞生长和增殖的碳源，该第一基因可操作地与(ii)控制该异源基因表达的启动子DNA片段和(iii)终止子DNA片段连接；(b)使异养培养条件保持足以使所述的转化植物细胞表达所述的异源酶、生长和增殖的一段时间；和(c)回收所说的转基因增殖细胞。 |
| 摘要 | 本发明涉及用于增加在异养培养条件下培养的转化的和非转化的植物细胞混合物中的转化植物细胞的数量的选择方法。根据该方法，在一种培养基中，在异养培养条件下培养转化的和非转化的植物细胞混合物，所述培养基含有非转化植物细胞增殖和生长所需的基本营养和约1.5－3倍标准量的磷，其中不含支持所述生长和增殖的碳源。由加密碳源替代所利用的碳源，所述加密碳源不支持所述的非转化植物细胞的生长和增殖。转化的植物细胞有插入到至少含有一个表达盒的其基因组中的异源DNA片段。该表达盒含有一个异源DNA选择性标记片段，该片段包括编码异源酶的第一异源基因，该基因的表达将加密碳源转化为在异养培养条件下支持转化植物细胞生长和增殖的碳源。另外，本发明还涉及提高在延迟的选择性培养条件下培养的转化的和非转化的植物细胞混合物中转化植物细胞的数量的选择方法。 |
| 国际公布 | WO1996/031512 英 1996.10.10 |
