| 公开(公告)号 | CN1325638C |
| 公开(公告)日 | 2007.07.11 |
| 申请(专利)号 | CN200410075550.6 |
| 申请日期 | 2004.12.21 |
| 专利名称 | 高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法 |
| 主分类号 | C12N5/10(2006.01)I |
| 分类号 | C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 山东大学 |
| 发明(设计)人 | 孙汶生;刘玉刚;张 秋;高立芬;石永玉;刘素侠;朱法良;郭 春 |
| 地址 | 250061山东省济南市经十路73号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 济南圣达专利商标事务所 |
| 代理人 | 郑华清 |
| 国省代码 | 山东;37 |
| 主权项 | 一种高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法，由以下步骤组成： (1)载体构建：载体pcDNA3经EcoR V线性化后用牛小肠碱性磷酸酶使其去磷酸化，重组克隆载体p3.6II经Pvu II酶切后获得1.1倍的HBV DNA，以T4 DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3；转化大肠杆菌感受态细胞DH5α，经抗性筛选、酶切、测序鉴定重组质粒pcDNA3-HBV1.1； (2)将含有1.1倍HBV DNA的重组载体pcDNA3-HBV1.1利用尾静脉高压注射的方法导入动物体内，建立高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型； (3)模型鉴定。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法，由以下步骤组成：(1)载体构建：载体pcDNA3经EcoR V线性化后用牛小肠碱性磷酸酶使其去磷酸化，重组克隆载体p3.6II经Pvu II酶切后获得1.1倍的HBV基因片段，以T4 DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3；转化大肠杆菌感受态细胞DH5α，经抗性筛选、酶切、测序鉴定重组质粒；(2)将含有1.1倍HBV DNA的重组载体利用尾静脉高压注射的方法导入动物体内，建立高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型；(3)模型鉴定。本发明的方法制作过程简单易行，能广泛推广应用；制作过程时间短，对实验动物的损伤小，动物死亡率低；获得的模型能高水平的表达HBsAg，亦能较高水平的表达HBeAg。模型可作为乙肝治疗药物的筛选平台，用于HBV感染的基础研究和临床相关研究。 |
| 国际公布 |
