| 公开(公告)号 | CN101070339A |
| 公开(公告)日 | 2007.11.14 |
| 申请(专利)号 | CN200710108076.6 |
| 申请日期 | 2007.05.24 |
| 专利名称 | 桑寄生抗肝癌BEL-7402蛋白的制备方法 |
| 主分类号 | C07K1/20(2006.01)I |
| 分类号 | C07K1/20(2006.01)I;C07K2/00(2006.01)I;A61K36/185(2006.01)N;A61P35/00(2006.01)N;A61P1/16(2006.01)N |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 2006.5.26 CN 200610026979.5 |
| 申请(专利权)人 | 上海大学 |
| 发明(设计)人 | 刘山莉;张林甦;张 健 |
| 地址 | 200444上海市宝山区上大路99号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海上大专利事务所 |
| 代理人 | 顾勇华 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种桑寄生抗肝癌BEL-7402蛋白制备方法，其特征在于具有以下工艺过程和步骤： a.桑寄生粗品蛋白的制备：将干燥的中草药桑寄生粉碎成200目粉末，用0.1～0.3mol/L氯化钠溶液在4℃下浸提12～24小时，浸提液用布氏漏斗过滤，得滤液；在滤液中加入硫酸铵固体，调至饱和度为60～80％，随后在4℃下静置过夜；然后用离心分离机在6000rpm转速下低温离心分离20分钟，得沉淀物粗品蛋白CLP； b.粗品蛋白的分子筛层析纯化：将上述所得的粗品蛋白CLP用去离子水溶解，并用Tris-HCI缓冲液透析，随后用孔径为0.45μ滤膜超滤；滤液上SephadexG100分子筛层析柱，用0.05mol/L Tris-HCI缓冲液洗脱，流速为1毫升/分钟，每5分钟收集1管，分部收集；检测蛋白质含量后，合并收集管得二部分有效组分；然后冷冻干燥，得二部分分子筛凝胶层析产品，即为纯化后的桑生蛋白。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种桑寄生植物中草药中抗肝癌BEL-7402蛋白的提取或制备方法，属生有分离纯化工艺方法技术领域。本发明方法的特征在于具有以下工艺步骤：(1)将中草药桑寄生粉碎，用氯化钠溶液浸提12～24小时，抽滤混合物得滤液；(2)滤液中加入硫酸铵固体调至饱和度70％，离心分离得沉淀物粗品蛋白；(3)将粗品蛋白以水溶解、超滤，滤液上层析柱得蛋白活性组分，然后冷冻干燥，得纯化后的桑寄生蛋白。由MTT法检测肝癌细胞BEL-7402生长抑制实验结果表明，桑寄生蛋白对肝癌细胞BEL-7402生长抑制作用较为显著。 |
| 国际公布 |
