| 公开(公告)号 | CN1280417C |
| 公开(公告)日 | 2006.10.18 |
| 申请(专利)号 | CN200410088717.2 |
| 申请日期 | 2004.11.01 |
| 专利名称 | 一种人酪氨酸酶表达载体及其应用 |
| 主分类号 | C12N15/63(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/63(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N9/00(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 清华大学 |
| 发明(设计)人 | 陈国强;王宏涛;李振国;吴 琼 |
| 地址 | 100084北京市海淀区清华园 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 关 畅 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种人酪氨酸酶表达载体，是转化了人酪氨酸酶基因和具有序列表中序列1核苷酸序列的His-tag基因的巴斯德毕赤酵母表达载体；所述巴斯德毕赤酵母表达载体为pPIC3.5K、pPIC3、pPIC9、pHIL-D1、pA0804、pA0815、pPSC3K或pPIC9K。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种人酪氨酸酶表达载体及其应用，其目的是提供一种人酪氨酸酶表达载体及导入该载体的重组巴斯德毕赤酵母细胞和利用该重组细胞生产人酪氨酸酶的方法。该人酪氨酸酶表达载体是含有人酪氨酸酶基因和His-tag基因的巴斯德毕赤酵母表达载体。表达人酪氨酸酶的方法，包括培养重组巴斯德毕赤酵母细胞，甲醇诱导表达人酪氨酸酶及利用金属亲和层析分离纯化人酪氨酸酶的步骤。本发明的人酪氨酸酶基因表达载体通过同源重组使人酪氨酸酶基因整合入巴斯德毕赤酵母细胞的基因组中，稳定表达人酪氨酸酶，而且在发酵过程中无需使用昂贵的抗生素和IPTG，使生产成本大大降低，此外，巴斯德毕赤酵母的高密度生长，也有利于人酪氨酸酶的表达，表达量可达0.39g/L。 |
| 国际公布 |
