




| 公开(公告)号 | CN1318586C |
| 公开(公告)日 | 2007.05.30 |
| 申请(专利)号 | CN02822098.6 |
| 申请日期 | 2002.10.30 |
| 专利名称 | 短的双链RNAs的体外合成方法 |
| 主分类号 | C12N15/11(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/11(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;A61K31/713(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 2001.11.5 US 60/337,975 |
| 申请(专利权)人 | 詹森药业有限公司 |
| 发明(设计)人 | M·D·德贝克;A·N·哈里斯 |
| 地址 | 比利时比尔斯 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | 2002-10-30 PCT/EP2002/012165 |
| 进入国家日期 | 2004.05.08 |
| 专利代理机构 | 中国专利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 李 波;徐雁漪 |
| 国省代码 | 比利时;BE |
| 主权项 | 一种用于合成长度少于30个核苷酸的靶特异性短的双链RNAs的方法,包括以下步骤:a)在一种反应混合物中混合靶特异性有义寡核苷酸模板和T7RNA聚合酶,以便形成模板延伸的有义寡核糖核苷酸产物;b)在一种反应混合物中混合靶特异性反义寡核苷酸模板和T7RNA聚合酶,以便形成模板延伸的反义寡核糖核苷酸产物;和c)让在步骤a)中获得的有义寡核糖核苷酸产物与在步骤b)中获得的互补性反义寡核糖核苷酸产物杂交,其特征在于:步骤a)和b)的寡核苷酸模板包括由图1所示的截短的T7 RNA聚合酶启动子序列组成的RNA聚合酶启动子序列,在所述模板链的5’末端用靶特异性模板序列延伸,其中,所述靶特异性模板序列包括位于5’末端的两个鸟苷,和位于3’末端的两个胞苷。 |
| 摘要 | 本发明涉及合成短的双链RNAs的领域。披露了利用噬菌体聚合酶和用靶序列特异性单链DNA寡核苷酸作模板的体外转录方法。本发明特别适用于合成短的干扰RNAs(siRNAs),业已证实这种干扰RNAs是在植物中的转录后基因沉默期间引起序列特异性RNA降解,以及无脊椎动物和脊椎动物系统的RNA干扰中的关键中间体。 |
| 国际公布 | 2003-05-15 WO2003/040294 英 |

