| 公开(公告)号 | CN1249232C |
| 公开(公告)日 | 2006.04.05 |
| 申请(专利)号 | CN03115732.7 |
| 申请日期 | 2003.03.11 |
| 专利名称 | 日本血吸虫（中国大陆株)MFS4基因的克隆、表达和DNA疫苗 |
| 主分类号 | C12N15/30(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/30(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I;A61K39/002(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所;上海动物生物技术研究中心;农业部动物寄生虫学重点开放实验室 |
| 发明(设计)人 | 林矫矫;傅志强;张 亮;苑纯秀;刘金明;冯新港;蔡幼民 |
| 地址 | 200232上海市石龙路345弄3号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海新天专利代理有限公司 |
| 代理人 | 王 巍 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种编码日本血吸虫MFS4基因的核苷酸序列，其特征在于它具有如下的核苷酸序列及相应的氨基酸序列：gtatcatatcgttaacgcgctccagttttgtttttgcccaggtattataatggcggtt58MetAlaVal1ggtggtcagaaaaaggtcactaaaggggggaagaaaggaggcaaaaag106GlyGlyGlnLysLysValThrLysGlyGlyLysLysGlyGlyLysLys51015aaaacggctgatccattctctaaaaaggagtggtatgatatcaaggct154LysThrAlaAspProPheSerLysLysGluTrpTyrAspIleLysAla20253035ccagctatgtttcctaaaaggacatgtgcaagaacgcttgtcacacga202ProAlaMetPheProLysArgThrCysAlaArgThrLeuValThrArg404550actcagggtactcgcatagccagtgaagcacttaagggtcgtgttgtt250ThrGlnGlyThrArgIleAlaSerGluAlaLeuLysGlyArgValVal556065acacttagtcttggggatctgagcgaaaagaacgaagaagtcttccgt298ThrLeuSerLeuGlyAspLeuSerGluLysAsnGluGluValPheArg707580aaattcaagcttcaaatcgaagatgtccaggggcgtcattgtctaaca346LysPheLysLeuGlnIleGluAspValGlnGlyArgHisCysLeuThr859095aatttccacggattagaacttactcgagacaaactatgttcagttgtt394AsnPheHisGlyLeuGluLeuThrArgAspLysLeuCysSerValVal100105110115gttaagtggcggtcaactatagaagcgcacgtcgacgtcaaaacaaca442ValLysTrpArgSerThrIleGluAlaHisValAspValLysThrThr120125130gatggatacttacttcgtttctttattatcacgttcactccaagtgta490AspGlyTyrLeuLeuArgPhePheIleIleThrPheThrProSerVal135140145ccacggtctgaaaggctccactcttatgctcagaccacacgcataaaa538ProArgSerGluArgLeuHisSerTyrAlaGlnThrThrArgIleLys150155160cggattcgcgctcgccttgttgagataatccagcaagaggtttctact586ArgIleArgAlaArgLeuValGluIleIleGlnGlnGluValSerThr165170175tgcgatctgaaagaggtcgttaataagcttattccagattccattgca634CysAspLeuLysGluValValAsnLysLeuIleProAspSerIleAla180185190195caagacgctcgaaaagcggcatcatggatatatccactaggtgagaca682GlnAspAlaArgLysAlaAlaSerTrpIleTyrProLeuGlyGluThr200205210tttatccgcaaagttaaggttttaaaaagaccaaaagctgatctcgct730PheIleArgLysValLysValLeuLysArgProLysAlaAspLeuAla215220225cggctcatggaacttcatggtgaatcaaagtcaactgcccctggtgag778ArgLeuMetGluLeuHisGlyGluSerLysSerThrAlaProGlyGlu230235240actgtatcccgtccagatcactatgaacctccgaaagttgattcagtg826ThrValSerArgProAspHisTyrGluProProLysValAspSerVal245250255taattcaataaagaatttcatccggaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa871。 |
| 摘要 | 本发明涉及生物基因领域，具体涉及日本血吸虫(中国大陆株)MFS4基因的基因序列、免疫筛选、在大肠杆菌中的表达、DNA疫苗的构建及小鼠免疫保护试验。本发明基于我们对东方田鼠抗日本血吸虫病机理研究的发现，用健康东方田鼠血清IgG3抗体免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库，获得一个阳性克隆，用RACE技术扩增出含ORF的基因。同源性序列分析表明其为一个新基因(MFS4)，开放阅读框含780bp，编码259个氨基酸。将MFS4基因亚克隆至原核表达质粒pET28a(+)中，构建重组表达质粒pET28a/MFS4，在BL21(DE3)表达菌中获得高效表达，融合蛋白分子量约35kD，具有良好的抗原性；将该基因亚克隆至真核表达质粒pcDNA3中，构建成重组质粒pcDNA3/MFS4，制备DNA疫苗免疫昆明系小鼠，获得28.6％的减虫率、21.73％的减卵率。 |
| 国际公布 |
