| 公开(公告)号 | CN1743457A |
| 公开(公告)日 | 2006.03.08 |
| 申请(专利)号 | CN200410073165.8 |
| 申请日期 | 2004.10.11 |
| 专利名称 | 人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌高表达载体和制备方法 |
| 主分类号 | C12N15/70(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 发明(设计)人 | 陈苏民;秦 云;陈南春 |
| 地址 | 710049陕西省西安市长乐西路15号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 西安通大专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 孙 枫 |
| 国省代码 | 陕西;61 |
| 主权项 | 一种人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌表达载体，其特征在于：所述的人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌表达载体是指用分子克隆技术将从人体组织cDNA文库中扩增得到人骨形成蛋白-4成熟肽的cDNA序列，再克隆重组获得的大肠杆菌表达载体pDH2-hB4m，该载体能够在大肠杆菌中高水平表达出人骨形成蛋白-4成熟肽，载体DNA全长4,014个核苷酸对，全部核苷酸序列如下：1AGATCTCTCTCACCTACCAAACAATGCCCCCCTGCAAAAAATAAATTCATATAAAAAACATCTAGAGAGAGTGGATGGTTTGTTACGGGGGGACGTTTTTTATTTAAGTATATTTTTTGT61TACAGATAACCATCTGCGGTGATAAATTATCTCTGGCGGTGTTGACATAAATACCACTGGATGTCTATTGGTAGACGCCACTATTTAATAGAGACCGCCACAACTGTATTTATGGTGACC121CGGTGATACTGAGCACATCAGCAGGACGCACTGACCACCATGAAGGTGACGCTCTTAAAAGCCACTATGACTCGTGTAGTCGTCCTGCGTGACTGGTGGTACTTCCACTGCGAGAATTTT181ATTAAGCCCTGAAGAAGGGCAGCATTCAAAGCAGAAGGCTTTGGGGTGTGTGATACGAAATAATTCGGGACTTCTTCCCGTCGTAAGTTTCGTCTTCCGAAACCCCACACACTATGCTTT241CGAAGCATTGGTTAAAAATTAAGGAGAATTCATGAAGCATCACTCACAGCGGGCCAGGAAGCTTCGTAACCAATTTTTAATTCCTCTTAAGTACTTCGTAGTGAGTGTCGCCCGGTCCTT301GAAGAATAAGAACTGCCGGCGCCACTCGCTCTATGTGGACTTCAGCGATGTGGGCTGGAACTTCTTATTCTTGACGGCCGCGGTGAGCGAGATACACCTGAAGTCGCTACACCCGACCTT361TGACTGGATTGTGGCCCCACCAGGCTACCAGGCCTTCTACTGCCATGGGGACTGCCCCTTACTGACCTAACACCGGGGTGGTCCGATGGTCCGGAAGATGACGGTACCCCTGACGGGGAA421TCCACTGGCTGACCACCTCAACTCAACCAACCATGCCATTGTGCAGACCCTGGTCAATTCAGGTGACCGACTGGTGGAGTTGAGTTGGTTGGTACGGTAACACGTCTGGGACCAGTTAAG481TGTCAATTCCAGTATCCCCAAAGCCTGTTGTGTGCCCACTGAACTGAGTGCCATCTCCATACAGTTAAGGTCATAGGGGTTTCGGACAACACACGGGTGACTTGACTCACGGTAGAGGTA541GCTGTACCTGGATGAGTATGATAAGGTGGTACTGAAAAATTATCAGGAGATGGTAGTAGACGACATGGACCTACTCATACTATTCCACCATGACTTTTTAATAGTCCTCTACCATCATCT601GGGATGTGGGTGCCGCTGATAATCTAGAGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTTCTGTTTTGCCCTACACCCACGGCGACTATTAGATCTCAGCTGGACGTCCGTACGTTCGAAGACAAAAC661GCGGATGAGAGAAGATTTTCAGCCTGATACAGCTTAAATCAGAACGCAGAAGCGGTCTGACGCCTACTCTCTTCTAAAAGTCGGACTATGTCGAATTTAGTCTTGCGTCTTCGCCAGACT721TAAAACAGAATTTGCCTCCCGGCAGTAGCGCGGTGGTCCCACCTGACCCCATGCCGAACTATTTTGTCTTAAACGGAGGGCCGTCATCGCGCCACCAGGGTGGACTGGGGTACGGCTTGA781CAGAAGTGAAACGCCGTAGCGCCGATGGTAGTGTGGGGTCTCCCCATGCGAGAGTAGCCAGTCTTCACTTTGCGGCATCGCGGCTACCATCACACCCCAGAGGGGTACGCTCTCATCGGT841ACTGCCAGGCATCAAATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTATCTGACGGTCCGTAGTTTATTTTGCTTTCCGAGTCAGCTTTCTGACCCGGAAAGCAAAATAG901TGTTGTTTGTCGGTGAACGCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACACAACAAACAGCCACTTGCGAGAGGACTCATCCTGTTTAGGCGGCCCTCGCCTAAACTTG961GTTGCGAAGCAACGGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAACGCTTCGTTGCCGGGCCTCCCACCGCCCGTCCTGCGGGCGGTATTTGACGGTCCGTA1021CAAATTAAGCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTGTGTTTAATTCGTCTTCCGGTAGGACTGCCTACCGGAAAAACGCAAAGATGTTTGAGAAACA1081TTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGAATAAAAAGATTTATGTAAGTTTATACATAGGCGAGTACTCTGTTATTGGGACTATTTAC1141CTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTGAAGTTATTATAACTTTTTCCTTCTCATACTCATAAGTTGTAAAGGCACAGCGGGAATAA1201CCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAGGGAAAAAACGCCGTAAAACGGAAGGACAAAAACGAGTGGGTCTTTGCGACCACTTTCAT1261AAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCTTTCTACGACTTCTAGTCAACCCACGTGCTCACCCAATGTAGCTTGACCTAGAGTTGTCG1321GGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAACCATTCTAGGAACTCTCAAAAGCGGGGCTTCTTGCAAAAGGTTACTACTCGTGAAAATTT1381GTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCAAGACGATACACCGCGCCATAATAGGGCATAACTGCGGCCCGTTCTCGTTGAGCCAGCG1441CGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTGCGTATGTGATAAGAGTCTTACTGAACCAACTCATGAGTGGTCAGTGTCTTTTCGTAGAA1501ACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTTGCCTACCGTACTGTCATTCTCTTAATACGTCACGACGGTATTGGTACTCACTATTGTGA1561GCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACCGCCGGTTGAATGAAGACTGTTGCTAGCCTCCTGGCTTCCTCGATTGGCGAAAAAACGTG1621AACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATATTGTACCCCCTAGTACATTGAGCGGAACTAGCAACCCTTGGCCTCGACTTACTTCGGTAT1681CCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTAGGTTTGCTGCTCGCACTGTGGTGCTACGGACATCGTTACCGTTGTTGCAACGCGTTTGAT1741TTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGAATTGACCGCTTGATGAATGAGATCGAAGGGCC |
| 摘要 | 本发明涉及人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌表达载体及其所表达的人骨形成蛋白4成熟肽的制备方法。所述的载体是指用分子克隆技术重组获得的大肠杆菌表达载体pDH2-hB4m，载体全长4,014个核苷酸对；所述利用表达载体pDH2-hB4m制备具有生物学活性人骨形成蛋白-4成熟肽的方法，包括宿主菌转化表达、培养、纯化、复性、活性鉴定步骤。本发明所提供的大肠杆菌高表达载体和用该载体转化宿主菌表达人骨形成蛋白-4成熟肽的制备方法，可以作为新的基因工程产品及其方法推向临床治疗、诊断和科学研究应用，并推向市场。 |
| 国际公布 |
