| 公开(公告)号 | CN1221285C |
| 公开(公告)日 | 2005.10.05 |
| 申请(专利)号 | CN03134626.X |
| 申请日期 | 2003.09.28 |
| 专利名称 | 肝癌，胃癌和乳腺癌恶性肿瘤基因工程纳米疫苗的制备方法 |
| 主分类号 | A61K39/00 |
| 分类号 | A61K39/00;A61K39/39;A61K48/00;A61K9/127;A61K9/107;A61P35/00;C12N15/62 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 发明(设计)人 | 隋延仿;叶菁;吴道澄;李增山;;孙玉静;陈广生;曲萍 |
| 地址 | 710032 陕西省西安市长乐西路17号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 西安通大专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 李郑建 |
| 国省代码 | 陕西;61 |
| 主权项 | 一种肝癌、胃癌和乳腺癌恶性肿瘤基因工程纳米疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将肿瘤特异性抗原MAGE-1基因与生物免疫佐剂结核杆菌热休克蛋白70即Hsp70基因连接，构成MAGE-1～Hsp70融合基因，通过大肠杆菌进行原核表达，获得MAGE-1～Hsp70融合蛋白；2)上述MAGE-1～Hsp70融合蛋白表达产物经6M尿素变性，SephadexG-25凝胶色谱柱复性后，再通过Ni2+-NTAAgarose亲和色谱和ATP-Sepherose4B亲和色谱进行分离与纯化，得到有活性的MAGE-1～Hsp70融合蛋白；3)将有活性的MAGE-1～Hsp70融合蛋白与超抗原葡萄球菌肠毒素A以摩尔数比为1000∶1组合，构成复合抗原物；4)采用卵磷脂和胆固醇，通过超声技术制备纳米脂质体，包裹复合抗原物；5)最后，通过N-羟基琥珀亚胺酯与Hsp70分子连接，形成N-Hsp70，将N-Hsp70与纳米脂质体混合，N-Hsp70插入纳米脂质体磷脂膜外层，构成肝癌、胃癌和乳腺癌基因工程纳米疫苗。 |
| 摘要 | 本发明涉及肝癌、胃癌和乳腺癌恶性肿瘤基因工程纳米疫苗的制备方法，采用肿瘤特异性共有抗原基因黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)和生物免疫佐剂热休克蛋白70(Hsp70)基因连接，构成融合基因(MAGE-1～Hsp70)，通过大肠杆菌表达，分离与纯化，获得MAGE-1～Hsp70融合蛋白，经变性与复性，得到高活性的融合蛋白，将此融合蛋白与超抗原葡萄球菌肠毒素A组合，构成复合抗原物。制备纳米脂质体，包裹复合抗原物，通过N-羟基琥珀酰亚胺酯与Hsp70分子连接，形成N-Hsp70，将其插入纳米脂质体磷脂膜外层，构成肝癌、胃癌和乳腺癌恶性肿瘤基因工程纳米疫苗。采用本发明制备的基因工程纳米疫苗有以下优点：1)采用皮下注射，使用简便、安全；2)抗瘤广谱；3)具有靶向性；4)杀瘤效果强。 |
| 国际公布 |
