| 公开(公告)号 | CN1557960A |
| 公开(公告)日 | 2004.12.29 |
| 申请(专利)号 | CN200410005199.3 |
| 申请日期 | 2004.02.10 |
| 专利名称 | 一种分离抗菌肽的方法与分离的抗菌肽 |
| 主分类号 | C12P21/02 |
| 分类号 | C12P21/02;C12N15/81;C12N15/62;C07K19/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 2004.1.16 CN 200410015163.3 |
| 申请(专利权)人 | 刘秋云;赫 然 |
| 发明(设计)人 | 刘秋云;赫 然 |
| 地址 | 510275广东省广州市新港西路中山大学生物工程研究中心 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 广州知友专利代理有限公司 |
| 代理人 | 宣国华 |
| 国省代码 | 广东;44 |
| 主权项 | 一种分离抗菌肽的方法，其特征是利用高保真PCR构建酵母α交配因子前导肽与随机肽的融合DNA片段，用于随机肽的分泌表达；插入用EcoRI和XbaI双酶切的含有诱导型启动子的酿酒酵母载体；为避免未连接的线状DNA在转化后与酵母基因组DNA发生重组，用核酸外切酶III和绿豆芽核酸酶对其进行消化处理；纯化后电激转化酿酒酵母；转化子转接至棉子糖/半乳糖诱导表达平板，过夜生长后用含大肠杆菌菌种K12D31的上层培养基覆盖，观测抑菌圈；或用液体培养基诱导表达后测抑菌率；对阳性克隆进行PCR扩增，测序。 |
| 摘要 | 本发明公开了一个分离抗菌肽的方法与抗菌肽，构建酵母α交配因子前导肽与随机肽的融合DNA片段，插入含有诱导型启动子的酿酒酵母载体，用核酸外切酶III和绿豆芽核酸酶消化未连接的线状DNA，纯化后电激转化酿酒酵母，转化子过夜生长后用含大肠杆菌菌种K12D31的上层培养基覆盖，观测抑菌圈。用液体培养基诱导表达后测抑菌率。对阳性克隆进行PCR扩增，测序。本发明方法能简单、高效地发现抗菌寡肽和多肽；这将为抗生素的发现开辟新途径。 |
| 国际公布 |
