| 公开(公告)号 | CN1325651C |
| 公开(公告)日 | 2007.07.11 |
| 申请(专利)号 | CN01112983.2 |
| 申请日期 | 2001.05.24 |
| 专利名称 | 人重组乙型干扰素的高效表达及其应用 |
| 主分类号 | C12N15/63(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/63(2006.01)I;C12N15/67(2006.01)I;C12N15/20(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I;A61P19/02(2006.01)I;A61P17/06(2006.01)I;A61P3/10(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P1/16(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 大连金威基因技术有限公司 |
| 发明(设计)人 | 秦 莹 |
| 地址 | 116001辽宁省大连市民意街40号海景花园大厦25楼 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海东亚专利商标代理有限公司 |
| 代理人 | 董 梅 |
| 国省代码 | 辽宁;21 |
| 主权项 | 一种高效表达人重组乙型干扰素的方法，其特征在于：通过真核细胞表达载体来转化宿主细胞，使之生产重组人乙型干扰素，真核细胞表达载体是昆虫杆状病毒表达载体或酵母菌表达载体中的一种，其中：所述真核细胞表达载体是昆虫杆状病毒表达载体时，所述宿主细胞是昆虫细胞，克隆的人乙型干扰素通过去除天然的疏水性信号肽序列，代之以新的杆状病毒信号肽来进行修饰，这些嵌合基因被引入杆状病毒表达载体后，杆状病毒多角体蛋白启动子指导被感染的昆虫细胞中重组乙型干扰素蛋白的表达，而由18个氨基酸组成的杆状病毒信号肽仅指导人乙型干扰素的翻译进入昆虫细胞的糖基化途径，其本身并不出现在成熟的人乙型干扰素糖蛋白上；所述真核细胞表达载体是酵母菌表达载体时，所述宿主细胞是酵母菌，克隆的人乙型干扰素通过去除天然的疏水性信号肽序列，代之以新的分泌型酵母菌信号肽来进行修饰，这些嵌合基因被引入酵母菌表达载体后，被转化到酵母菌中发酵，同时生产重组人乙型干扰素，分泌型酵母菌信号肽指导乙型干扰素的翻译进入酵母细胞的糖基化途径，并分泌至培养上清中，其本身并不出现在成熟的人乙型干扰素糖蛋白上。 |
| 摘要 | 本发明人重组乙型干扰素的高效表达及其应用涉及采用生物基因工程的方法在真核细胞系统中表达重组人乙型干扰素，以及重组人乙型干扰素的用途。本发明人重组乙型干扰素的高效表达系通过真核细胞表达载体来转化宿主细胞，使之生产重组人乙型干扰素，所述真核细胞表达载体是昆虫杆状病毒表达载体时，所述宿主细胞是昆虫细胞；所述真核细胞表达载体是酵母菌表达载体时，所述宿主细胞是酵母菌。本发明利用具有糖基化功能的昆虫杆状病毒表达系统和酵母菌表达系统来表达人乙型干扰素基因，所表达和生产的蛋白量相对量大、纯度高。本发明中所描述的表达高产量重组人乙型干扰素的方法可以使临床应用所需要的重组蛋白药物的制备简单化和廉价化。 |
| 国际公布 |
