| 公开(公告)号 | CN100342026C |
| 公开(公告)日 | 2007.10.10 |
| 申请(专利)号 | CN200410027176.2 |
| 申请日期 | 2004.05.13 |
| 专利名称 | 重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体制备方法 |
| 主分类号 | C12P21/00(2006.01)I |
| 分类号 | C12P21/00(2006.01)I;A61K35/74(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 深圳新鹏生物工程有限公司 |
| 发明(设计)人 | 李政海;胡家华;田 宾;李继东 |
| 地址 | 518057广东省深圳市南山区高新技术园北区郎山二路 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 深圳市博锐专利事务所 |
| 代理人 | 张 明 |
| 国省代码 | 广东;44 |
| 主权项 | 一种重组人可溶性肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体制备方法，包括以下步骤：a、选用工程菌rsTRAIL96-281-pET15b-BL21(DE3)CGMCCNo.0659做菌株进行发酵培养，其特征在于，还包括步骤：b、对发酵培养所得菌体进行洗涤和超声破碎；c、对破碎所得菌体物质进行盐析处理；d、对盐析处理所得菌体物质进行层析纯化处理，包括以下步骤：①.在盐析处理所得菌体物质中加入Tris·Cl溶液，进行离心处理，保留上清；②.上疏水柱，收集穿柱峰；③.对收集物进行分子筛凝胶层析柱脱盐处理；④.上第一阴离子交换层析柱，收集20％盐浓度目的峰；⑤.对收集物进行分子筛凝胶层析柱脱盐处理；⑥.上第二阴离子交换层析柱，收集8％盐浓度目的峰；e、对层析纯化处理所得菌体物质进行缓冲液体系更换处理，包括以下步骤：①.对层析纯化处理所得菌体物质进行分子筛凝胶层析处理；②.把层析纯化处理所得菌体物质中的缓冲液更换为Na2HPO4-NaH2PO4溶液。 |
| 摘要 | 一种重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)制备方法，包括步骤a.选用工程菌rsTRAIL96-281-pET15b-BL21(DE3)CGMCC No.0659做菌株进行发酵培养，还包括步骤：b.对发酵培养所得菌体进行洗涤和超声破碎；c.对破碎所得菌体物质进行盐析处理；d.对盐析处理所得菌体物质进行层析纯化处理；e.对层析纯化处理所得菌体物质进行缓冲液体系更换处理。同现有技术相比较，采用本制备方法，可以实现TRAIL蛋白的工业化生产，为TRAIL蛋白的实际应用提供可能。 |
| 国际公布 |
