| 公开(公告)号 | CN1194086C |
| 公开(公告)日 | 2005.03.23 |
| 申请(专利)号 | CN02100859.0 |
| 申请日期 | 2002.02.01 |
| 专利名称 | 一种神经干细胞制剂的制备方法 |
| 主分类号 | C12N5/08 |
| 分类号 | C12N5/08;A61K35/54;A61K35/30;A61P43/00;A61P25/00;A61P21/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 北京科宇联合干细胞生物技术有限公司 |
| 发明(设计)人 | 沈丽;李凌松;张浣清;李肖霞 |
| 地址 | 100083 北京市学院路38号北京大学医学部会议中心一层北翼 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京元中知识产权代理有限责任公司 |
| 代理人 | 王明霞;母宗绪 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种神经干细胞制剂的制备方法，其特征在于人死亡胚胎脑组织用消化液消化后加入培养基中止消化，离心后加入培养基机械吹打为单细胞悬液，在CO2、37℃下经过体外培养，筛选出神经干细胞球，得到神经干细胞，在体外传3-6代，并在传代过程中纯化神经干细胞，得到神经干细胞制剂；所述的消化液为0.25％胰蛋白酶或0.25％胰蛋白酶和0.01％EDTA；所述的中止消化的培养基为DMEM/F12和10-20V％胎牛血清；所述的体外培养的培养基为下述组合物：(1)N2添加剂，0-1mlN2/100ml培养基或B27添加剂，0-1mlB27/100ml培养基DMEM/F128-20mg/ml(2)碱性成纤维细胞生长因子bFGF10-20ng/ml(3)表皮生长因子EGF10-20ng/ml(4)转铁蛋白transferring0.05-0.5mg/ml(5)硒酸钠2-10ng/ml(6)腐胺5-10μg/ml(7)胰岛素0.01-0.05mg/ml(8)L-谷氨酸胺0.1-0.5mg/ml(9)孕酮5.0-10ng/ml(10)抗生素：庆大霉素800-1300U/ml。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种神经干细胞制剂及其制备方法，是采用人胚胎脑组织用消化液消化后加入培养基中止消化，离心后机械吹打为单细胞悬液，加入培养基，在CO2、37℃下经过体外培养，筛选出神经干细胞球，即得到神经干细胞。中分离培养的神经干细胞，在体外传3-6代，并在传代过程中纯化神经干细胞，得到的神经干细胞制剂。所述神经干细胞制剂植入动物体内，不用免疫抑制剂或在少量免疫抑制剂的辅助治疗下，神经干细胞可以在自体生理微环境下分化形成一种类似于schwann细胞样的细胞，使髓鞘再生，脊髓功能获得重建，可以用于治疗人类脊髓疾病，特别是运动神经元病。 |
| 国际公布 |
