| 公开(公告)号 | CN1303218C |
| 公开(公告)日 | 2007.03.07 |
| 申请(专利)号 | CN200310122706.7 |
| 申请日期 | 2003.12.19 |
| 专利名称 | 过氧化物酶体增长因子活化受体拮抗剂和激动剂的筛选方法 |
| 主分类号 | C12Q1/34(2006.01)I |
| 分类号 | C12Q1/34(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国科学院上海药物研究所;上海先导药业有限公司 |
| 发明(设计)人 | 沈 旭;蒋华良;沈建华;陈 晴;陈 静;郭红霞;陈 帅;罗小民;庄贤韩 |
| 地址 | 201203上海市浦东张江高科技园区祖冲之路555号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海开祺知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 张 萍;费开逵 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种PPAR拮抗剂和激动剂的筛选方法，其特征在于利用酵母双杂交系统，采用酵母AH109基因组自带的MEL1基因作为双杂交的报告基因，通过测定α-半乳糖苷酶的活性来检测小分子化合物对PPAR与其共激活因子相互作用程度的影响，从而筛选PPAR拮抗剂和激动剂，包括如下步骤：(1)小鼠共激活因子CBP和酵母转录因子GAL4AD融合蛋白的表达质粒pGADT7-CBP的构建；(2)PPARγLBD和酵母转录因子GAL4BD融合蛋白的质粒pGBKT7-PPARγLBD的构建；(3)将质粒pGBKT7-PPARγLBD与质粒pGADT7-CBP转入酵母细胞AH109，得到酵母PPARγLBD-CBP AH109(保藏号为CGMCC No.1075，菌种于2003年12月15日保藏在北京中关村中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心)；(4)通过测定α-半乳糖苷酶的活性筛选化合物。 |
| 摘要 | 本发明涉及利用酵母双杂交系统，通过测定α-半乳糖苷酶的活性大小筛选PPAR拮抗剂和激动剂的方法。该方法包括(1)CBP和酵母GAL4AD融合蛋白(pGADT7-CBP)的质粒构建；(2)PPARγLBD和酵母GAL4BD融合蛋白(pGBKT7-PPARγLBD)的质粒构建；(3)将质粒pGBKT7-PPARγLBD与质粒GADT7-CBP依次转入酵母细胞AH109；(4)通过测定α-半乳糖苷酶的活性筛选化合物。 |
| 国际公布 |
